SDS-PAGE电泳跑出来条带怪怪的，求大佬看看

刚进汽车零部件厂的表面处理车间，技术员一枚，最近在做涂装前处理槽液里蛋白类添加剂的分析，自己学着跑SDS-PAGE。配的12%分离胶，跑出来marker倒是清楚，但样品条带要么糊成一团要么位置明显偏，求助下这种情况一般啥原因？

另外想问下上样量大概多少合适，我之前按5μL加的，感觉有点少又怕加多了拖尾。